Будь ласка, використовуйте цей ідентифікатор, щоб цитувати або посилатися на цей матеріал: http://rep.btsau.edu.ua/handle/BNAU/3611
Назва: Удосконалення методики виділення спор сибірки із ґрунту бактеріологічним методом
Інші назви: Improvement of the methods of bacteriological research of the soil on existence anthrax spores
Совершенствование бактериологического исследования почвы на наличие спор сибирской язвы
Автори: Рубленко, Ірина Олександрівна
Рубленко, Ирина Александровна
Rublenko, Iryna
Skrypnyk, Valerii
Скрипник, Валерий Григорьевич
Скрипник, Валерій Григорович
Мачуський, Олександр Вікторович
Мачуський, Александр Викторович
Machuskiy, Olexsandr
Ключові слова: сибірка;виділення;спори;ґрунт;культивування;Bacillus anthracis;vaccine;extraction;spores;soil;cultivation
Дата публікації: 2015
Видавництво: БНАУ
Бібліографічний опис: Рубленко І.О. Удосконалення методики виділення спор сибірки із ґрунту бактеріологічним методом / І.О. Рубленко, В.Г. Скрипник, О.В.Мачуський // Наук. вісник вет. медицини: зб-к наук. праць. - Біла Церква: БНАУ, 2015. - Вип. 2 (122). - C.89–95.
Короткий огляд (реферат): У статті наведені дані щодо удосконалення методу виділення спор Bac. anthracis із ґрунту. За результатами проведених досліджень встановлено, що виділення спор із ґрунту необхідно проводити з використанням детергенту Тритону Х–100, фільтрованого 1% бичачого сироваткового альбуміну у 0,01 моль/мл фосфатно-сольовому буфері, що дозволяє виділити більшу (за методикою №5 на поживному середовищі PLET виділяється 19,66% клітин від внесених, а за методиками №1, 2 (3), 4 – 3,3, 1/61 та 6,46 %) кількість спор із ґрунту, ніж за методикою описаною у ”Лабораторная диагностика сибирской язвы у животных и людей, обнаружение возбудителя в сырье животного происхождения и объектах внешней среды. Методические указания“.
Опис: Statistical data on diseases of animals and humans anthrax in recent years show a gradual decrease of outbreaks in Ukraine. However, the risk of new outbreaks of the disease is stored for decades. According to WHO data, the greatest incidence of anthrax falls on the territory of Europe. The aim of our study was to improve the selection method of dispute Bac. anthracis from soil. It is known that anthrax the pathogen Bacillus anthracis is not fastidious to nutrient, grows well on ordinary nutrient media. After cultivation of sowings it was found a slight difference in the number of units that form colonies (CFU) at different nutrient mediums: meat-peptone agar (MPA) MPA blood, Hettinger’s agar, soda MPA, trypton-soy agar (TSA) and environment PLET. According to the obtained of preliminary results of studies to extract Bacillus anthracis spores from the soil we have used the mediums MPA and PLET. Due to the fact that the methods №2 and №3 of soil investigation on the presence of spores as described in the guidelines "Laboratory diagnosis of anthrax in humans and extraction of anthrax from objects in the environment" and "Laboratory diagnosis and detection of anthrax" are identical, so we have received identical results. By results of researches while sing methods № 1 the number of spores внесених 100 g soil was highest (6969±9,46), compared to techniques according № 2–5. However, using the methodology № 1, when using the nutrient medium MPA, with concentration 6969 spores in the soil mass 100 g in average were extracted 200 CFU significantly lower (p<0,001), that probably higher at 157 of cells compared with the method № 2, but in 100 cells decrease with method № 5 (р<0,001). During the research of the samples with the method №1 and cultivation in medium PLEET was showed insignificantly greater amount of CFU (30 CFU) than in the medium of the cultivation MPA, which was significantly (p<0,001) higher, number of CFU relative to the results obtained by the method № 2, at the same time, but significantly (p<0,01) lower relative performance obtained by the methods № 5. That is, with the method №1, only 200 CFU were extracted at the concentration of 6969 spores per 100 g of soil, which corresponded to 2,87% of the total number of spores introduced into the soil. According to the results of research with the method № 2, № 3 on the MPA was exacted the least amount of CFU – 43 comparing to the № 1 and № 5 methods – 200; 300, respectively. The amount of spores, introduced into the 100 g of soil was on 221 units more compared with the method № 4, and on 2729 more than in the soil with the method № 5. The quantities of spores in 1 g of soil when determining with the method № 4 was 4182 CFU, so with this method is extracted CFU 4,09% that on 1,22% more, compared with the data obtained in the first method and on 3,12% more, compared with indicators obtained with the method № 2 and № 3. With applying the methodology № 5 it was extracted 300±0,22 CFU, while making 1673 spores per 100 g of soil. That was on 5297 spores in 100 g soil less, compared to the number of spores made with the method № 1 and on 2729 – with the method № 2, and on 2508 – with the method № 4. It should be noted, that this method (№ 5) is more effective, compared with other methods. It detects spores at the slightest their amount in 100 g of soil. However, with this method it is necessary to study only 2,5 g soil, whereas with the method of № 1 – 60 g, with the method of № 2 – 95 g, № 4 –10 g. It should be mentioned, that the reliability of the results is much higher with the method № 5, while it does not require large expenditures of time and reagents. The results of the application of the methodology for the allocation of № 5 soil of spores is more effective compared to methods № 1–4, it is confirmed more allocation CFU of 100 g soil on nutrient media and MPA and PLET. This technique gives the opportunity to achieve results that will have a higher degree of reliability. In the future, further testing techniques planned selection spores Bacillus anthracis is non-sterile soil.
URI (Уніфікований ідентифікатор ресурсу): http://rep.btsau.edu.ua/handle/BNAU/3611
ISSN: 2310-4902
УДК: 619:616.981.51
Розташовується у зібраннях:Наукові публікації

Файли цього матеріалу:
Файл Опис РозмірФормат 
udoskonalennja_metodyky.pdf917,17 kBAdobe PDFПереглянути/Відкрити


Усі матеріали в архіві електронних ресурсів захищені авторським правом, всі права збережені.