Дослідження імуномодулювальної дії нових пробіотичних препаратів

Abstract

Метою дослідження було визначити імуномодулювальні властивості пробіотичних штамів L. casei IMB В-7280, L. acidophilus IMB В-7279, В. animalis VKL та В. animalis VKB шляхом дослідження їх впливу на показники імунітету. Дослідження проведено на самицях мишей лінії BaLb/c вагою 18–20 г . Пробіотичні штами бактерій (кожний окремо) вводили мишам per os впродовж 7 діб один раз на добу. Доза пробіотичних препаратів на одну мишу (per os) складала 1х106 кл. Мишей присипляли ефірним наркозом, після цього проводили дислокацію шийних хребців. У перитонеальну порожнину за допомогою голки вводили живильне середовище 199 (5–7 мл). Після зовнішнього масажу черевної порожнини шкіряний покрив розрізали і за допомогою голки відбирали перитонеальний ексудат. Активність фагоцитозу (поглинальну здатність перитонеальних макрофагів мишей) вивчали у мікроскопічному тесті. Визначали показник фагоцитозу (ПФ) — відносну кількість клітин (у %), які поглинають латекс, а також фагоцитарне число (ФЧ) — середню кількість частинок латексу, захоплених одним фагоцитом (в ум. од.). Киснезалежну бактерицидність фагоцитів вивчали за допомогою тесту відновлення нітросинього тетразолію (НСТ-тест). Під мікроскопом переглядали 100 клітин і вираховували кількість клітин, які містили темно-сині гранули диформазану (у %). За різницею між показниками стимульованого і спонтанного НСТ-тесту визначали функціональний резерв (ФР) фагоцитів (у %). Результати проведених досліджень показали, що введення мишам L. casei IMB В-7280, L. acidophilus IMB В- 7279, В. animalis VKL та В. animalis VKB супроводжувалось активацією киснезалежної бактерицидної активності макрофагів перитонеальної порожнини на 1 та 6 добу досліду, що підтверджувалось суттєвим зростанням кількості НСТ-позитивних клітин. Одночасно встановлено,що пробіотичні штами бактерій ефективно підвищували поглинальну активність макрофагів перитонеальноїї порожнини. Під їх впливом впродовж усього терміну спостереження зростав ПФ макрофагів, спостерігалось підвищення фагоцитарного числа на 6 добу після введення мишам. L. casei IMB В-7280, L. acidophilus IMB В- 7279, В. animalis VKL та В. animalis VKB є перспективними для створення пробіотичних препаратів із імуномодулювальними властивостями. Целью исследования было определить иммуномодулирующие свойства пробиотических штаммов L. casei IMB В- 7280, L. acidophilus IMB В- 7279, В. animalis VKL. и В. animalis VKB путем исследования их влияния на показатели иммунитета. Исследование проведено на самках мышей линии BaLb/c весом 18-20 г. Пробиотические штаммы бактерий (каждый отдельно) вводили мышам per os в течение 7 суток один раз в сутки. Доза пробиотических препаратов на одну мышь (per os) составляла 1х106 кл. Мышей усыпляли эфирным наркозом, после этого проводили дислокации шейных позвонков. В перитонеальную полость с помощью иглы вводили питательную среду 199 (5-7 мл). После наружного массажа брюшной полости кожный покров разрезали и с помощью иглы отбирали перитонеальный экссудат. Активность фагоцитоза (поглотительную способность перитонеальных макрофагов мышей) изучали в микроскопическом тесте. Определяли показатель фагоцитоза (ПФ) — относительное количество клеток (в %), которые поглощают латекс, а также фагоцитарное число (ФЧ) — среднее количество частиц латекса, захваченных одним фагоцитом (в усл. ед.). Кислородозависимую бактерицидность фагоцитов изучали с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ - тест). Под микроскопом просматривали 100 клеток и рассчитывали количество клеток, содержащих темно-синие гранулы диформазана (в %). По разнице между показателями стимулированного и спонтанного НСТ - теста определяли функциональный резерв (ФР) фагоцитов (в %). Результаты проведенных исследований показали, что введение мышам L. casei IMB В- 7280, L. acidophilus IMB В- 7279, В. animalis VKL и В. animalis VKB сопровождалось активацией кислородозависимой бактерицидной активности макрофагов перитонеальной полости на 1 и 6 сутки опыта, что подтверждалось существенным ростом количества НСТ- положительных клеток. Одновременно установлено, что пробиотические штаммы бактерий эффективно повышали поглотительную активность макрофагов перитонеальной полости. Под их влиянием в течение всего срока наблюдения роста ПФ макрофагов наблюдалось повышение фагоцитарного числа на 6 сутки после введения мышам. L. casei IMB В- 7280, L. acidophilus IMB В- 7279, В. animalis VKL и В. animalis VKB являются перспективными для создания пробиотических препаратов с иммуномодулирующими свойствами.